ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題

1、一個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)幾個(gè)樣品？

1）48T 可做42個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；96T 可做90個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

2）以96T試劑盒來(lái)算，定量的試劑盒一般可以做90個(gè)左右的樣品，定性的試劑盒可以做94個(gè)左右的樣品

3）96T的ELISA試劑盒，去除標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔檢測(cè)，最多還能檢測(cè)80個(gè)標(biāo)本；48T的最多30個(gè)樣本。

2、elisa試劑盒96T的能做檢測(cè)多少血清樣品？板能重復(fù)利用嗎？

96T，一般做復(fù)孔的話(huà)，做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)需要16個(gè)孔，剩下80個(gè)孔就可以做40個(gè)樣本。這個(gè)板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。

3、用elisa法測(cè)血清里的一種抗原，沒(méi)有現(xiàn)成的試劑盒用，買(mǎi)抗體對(duì)自己包被好嗎？會(huì)不會(huì)可靠呢？

如果你覺(jué)得技術(shù)不錯(cuò)有隊(duì)其他公司不放心，可以自己購(gòu)買(mǎi)抗體對(duì)自己包被。

4、western 和ELISA 處理樣本有何差別？

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。ELISA試劑盒建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復(fù)凍融。

ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因?yàn)?span style="font-size: 16px; font-family: Calibri; padding: 0px;">ELISA上樣量基本都是每孔100ul，做復(fù)孔，每個(gè)樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時(shí)要大于200ul每支），直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存，一樣避免反復(fù)凍融。不過(guò)ELISA最好少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，或者查閱文獻(xiàn)，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測(cè)量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過(guò)高測(cè)量不準(zhǔn)，或者濃度過(guò)低，小于試劑盒低可測(cè)濃度。